Cardioimplante autólogo de células madre de médula ósea en territorios miocárdicos necróticos / Cardiac implant autologous bone marrow stem cells in necrotic myocardial territories / Implante de células-tronco cardíacas autólogas da medula óssea em áreas de necrose miocárdica

Introducción. El concepto clásico de que el corazón era un órgano no regenerativo ha cambiado en la actualidad, por el de ser un órgano en regeneración continua, constituyendo una evidencia sólida de que el tejido cardíaco se encuentra en un proceso continuo de crecimiento, muerte y renovación. Material y método. Se protocolizaron doce pacientes desde el 29 de Mayo de 2004 al 30 de Agosto de 2007. Se excluyeron cinco y de los 7 restantes, cinco fueron evaluados. Se extrajeron por punción de la cresta ilíaca de cada paciente en condiciones estériles 60 cm³ de médula ósea, y se obtuvieron por sedimentación células madre que se identificaron por inmunomarcación con anticuerpo monoclonal anti-CD34 en citómetro de flujo.La evaluación de la viabilidad miocárdica pre y post implante se realizó con PET-FDG. Finalizadas las anastomosis, se implantaron las células madre directamente por punción en territorios no viables. Resultados. Se expresan como porcentajes (variables categóricas) y como media con su desvío estándar (variables continuas). Para evaluar significancia en el cambio de la fracción de eyección se utilizó el test de Wilcoxon. Se consideró significativa una p<0,05. De los 15 segmentos no viables, se implantaron 11 (73%) y se recuperaron 4 (36,36%). La fracción de eyección de ventrículo izquierdo media evaluada por SPECT gatillado fue del 30,2±4,9% en el pre procedimiento y del 34,8±9,5% en el post procedimiento, la mejoría fue de 4,6 puntos (p=0,34), el 60% de los pacientes mejoraron. Conclusiones. Hay una relación entre la concentración de CD34+ (que fue baja: 0,76% de media) y la viabilidad miocárdica. La aparición de viabilidad miocárdica en el 36,36% de los segmentos implantados fue el hallazgo más importante. El método demostró ser seguro, efectivo y reproducible. La utilización de PET-FDG en todos los pacientes para evaluación de viabilidad pre y post implante como método gold standard fue evidencia de regeneración tisular.

Introduction. Currently, the classical concept that the heart was a non-regenerative organ has changed, by being an organ in continuous regeneration constitute strong evidence that cardiac tissue is in a continuous process of growth, death and renewal. Materials and methods. Twelve patients were protocolized from May 29, 2004 to August 30, 2007. We excluded five. Of the 7 remaining, five were evaluated by puncturing of the iliac crest from each patient under sterile conditions 60 cm³ extracted bone marrow and stem cells were obtained by sedimentation and identified by immunostaining with anti-CD34 monoclonal antibody in the flow cytometer. The assessment of myocardial viability before and after implantation was performed with PET-FDG. After the completion anastomosis, the stem cells were implanted directly by puncture nonviable territories. Results. They are expressed as percentages (categorical variables) and as mean with standard deviation (continuous variables). To assess significance in changing ejection fraction was used the Wilcoxon test. Was considered significant at p <0.05. We implanted 11 (73%) of the 15 segments non-viable were recovered 4 (36.36%). The ejection fraction of the left ventricle assessed by SPECT triggered average was 30.2 ± 4.9% in the pre procedure and 34.8 ± 9.5% in the post process, the improvement was 4.6 points (p=0.34), 60% of the patients improved. Conclusions. There is a relationship between the concentration of CD34 + (which was low 0.76% on average) and myocardial viability. The appearance of myocardial viability in 36.36% of the implanted segments was the most important finding. The method proved to be safe, effective and reproducible. The use of PET-FDG in all patients for viability assessment before and after implantation as gold standard method was evidence of tissue regeneration.

Introdução.O conceito clássico que o coração era um órgão não regenerativo mudou agora, por ser um órgão em regeneração contínua constituem fortes provas de que o tecido cardíaco é um processo contínuo de crescimento, morte e renovação. Material e método.Doze pacientes foram incluídos em um protocolo de pesquisa a partir de 29 de Maio de 2004 a 30 de Agosto de 2007. Cinco excluídos. Dos restantes sete, cinco foram avaliados por punção da crista ilíaca do paciente em condições estéreis, foram obtidos 60 cm³ de medula óssea. As células-tronco foram recolhidos por sedimentação e identificados por imunomarcação com o anticorpo monoclonal anti-CD34 no citómetro de fluxo. A avaliação da viabilidade miocárdica antes e após a implantação foi realizada com PET- FDG. Após o término das anastomoses, as células-tronco foram implantadas diretamente por punção em territórios não viáveis. Resultados. Eles são expressos como porcentagens (variáveis categóricas) e média com desvio padrão (variáveis contínuas). Para avaliar a importância na mudança de fração de ejeção foi utilizado o teste de Wilcoxon. Considerou-se significante p<0,05. Dos 15 segmentos não viáveis,foram implantados 11 (73%) e quatro (36,36%) foram recuperados. A fração de ejeção do ventrículo esquerdo avaliada pelo SPECT foi de 30,2±4,9% na fase pré e de 34,8±9,5% no processo de pós, a melhoria foi de 4,6 pontos (p=0,34), 60% dos pacientes melhoraram. Conclusões. Existe uma relação entre a concentração de células CD34+ (baixa: 0,76 %, em média) e a viabilidade do miocárdio. A incidência da viabilidade do miocárdio em 36,36% dos segmentos implantados foi o achado mais importante. O método demonstrou ser seguro, eficaz e reprodutível. O uso de PET-FDG em todos os pacientes para avaliação de viabilidade, antes e depois da implantação como método padrão-ouro, foi evidência de regeneração de tecidos.

Expresión vascular de factores de transcripción proinflamatorios en un modelo de síndrome metabólico / Vascular expression of proinflammatory transcription factors in a model of metabolic syndrome

Con el objetivo de estudiar la expresión de factores de transcripción sensibles a redox en las arterias en un modelo experimental de hipertensión arterial asociada con síndrome metabólico (FFHR), ratas Wistar Kyoto (WKY) y espontáneamente hipertensas (SHR) macho de 30 días fueron distribuidas en forma aleatoria en cuatro grupos (n = 8 c/u): 1) WKY (control), 2) FFR: administración de fructosa 10 por ciento P/V en el agua de bebida durante un período de 10 semanas, 3) SHR y 4) FFHR: ídem 3 + 2.Los grupos FFR y FFHR presentaron valores de HOMA y área bajo la curva en la prueba de tolerancia característicos de resistencia a la insulina. También mostraron diferencias significativas en los niveles de triglicéridos y colesterol HDL respecto de sus controles y aumentaron su presión arterial sistólica. El estado de estrés oxidativo, demostrado por la actividad de NAD(P)H oxidasa y TBARS fue significativamente mayor en FFR y FFHR, en tanto que en estos mismos grupos disminuyó significativamente la actividad de eNOS. El peso cardíaco relativo aumentó en FFR y FFHR, con mayor área de los miocitos de la pared libre ventricular. Los cortes de arteria carótida izquierda mostraron crecimiento de su capa media de tipo eutróico en FFHR. La densidad óptica media para los anticuerpos anti-c-fos, anti-NF-kB y anti-VCAM-1 fue mayor en las arterias renales de resistencia y en la carótida de los grupos FFHR y FFR. Los datos confirman el desarrollo del modelo experimental patológico y sugieren que el estrés oxidativo y la consecuente activación de genes que participan en el proceso inflamatorio intervienen activamente en el desarrollo de remodelación vascular.

With the goal of assessing the expression of redox-sensitive transcription factors in the arteries of an experimental model of hypertension associated to metabolic syndrome (FFHR), we studied Wistar Kyoto rats (WKY) and spontaneously hypertensive 30-day male rats (SHR), which were randomly distributed in 4 groups (n=8 in each group). Group 1: WKY (control rats), Group 2: FFR: rats that received 10 per cent W/V fructose in drinking water during a 10-week period, Group 3: SHR rats, and Group 4: FFHR: 2+3, i.e., SHR rats treated like Group 2. With the glucose tolerance test, groups FFR and FFHR had HOMA (homeostasis assessment model) and area under the curve (AUC) values that were characteristic of insulinresistance. They also showed significant differences in triglyceride and HDL cholesterol levels compared to controls, and increased their systolic blood pressure. Oxidative stress, as assessed by NAD(P)H oxidase and TBARS (thiobarbituric acid reactive substances) activity was significantly higher in FFR and FFHR groups, whereas in these same groups eNOS activity decreased markedly. Relative cardiac weight increased in FFR and FFHR groups, with a larger myocyte area in the left ventricular free wall. Sections of the left carotid artery exhibited eutrophic growth of the middle layer in FFHR. Mean optical density for anti-c-fos, anti-NF-kB and anti-VCAM-1 antibodies was greater in resistance renal arteries and in the carotid artery of FFHR and FFR groups. The data confirm the findings of the pathological experimental model and suggest that oxidative stress and the subsequent activation of genes that participate in the inflammatory process are actively involved in the development of vascular remodeling.

Changes of inducible nitric oxide synthase in aortic cells during the development of hypertension: effect of angiotensin II

Nitric oxide (NO) generation by inducible nitric oxide synthase (iNOS) in the vascular smooth muscle cells (VSMC), may play a role in blood vessel tone regulation. Lipopolysaccharide (LPS) induced iNOS activity and subsequent nitrite production by cultured aortic VSMC, from SHR with an established chronic blood pressure elevation (adult SHR) or during the period preceding the development of hypertension (young SHR) and from age-matched normotensive Wistar (W) rats were compared. Angiotensin II (Ang II) effect was also evaluated. Both basal LPS-induced iNOS activity and nitrite accumulation were significantly lower in young SHR VSMC compared to young W rat cells. In contrast, adult hypertensive and normotensive rat cells did not differ in NO generation. Besides, young SHR cells exhibited a significant smaller iNOS activity and nitrites than adult SHR cells. After 24 h-incubation with Ang II, both variables were markedly reduced in all groups. The proportional reduction of iNOS activity and nitrites by Ang II was not different between hypertensive and normotensive rat cells, at any age. However, this Ang II inhibitory effect was greater in both adult SHR and W cells than in VSMC from young rats. In conclusion, a reduced LPS-induced iNOS activity and NO generation was observed in VSMC form spontaneously hypertensive rats before the raise of blood pressure, but not in adult hypertensive rat cells. Additionally, an inhibitory effect of angiotensin II on these variables is described. We can speculate that the impairment in vascular smooth muscle NO production precedes the development of hypertension in SHR and may play a pathophysiologic role in the early blood pressure elevation in genetically hypertensive rats.

Proliferación de células musculares lisas vasculares de ratas intolerantes a la glucosa / Vascular smooth muscle cells proliferation in rats with glucose intolerance

El síndrome X se caracteriza principalmente por resistencia a la insulina e hipertensión arterial (HTA). En un modelo experimental que reproduce esta situación patológica (ratas con sobrecarga crónica de fructosa [FFR] se examinó la respuesta proliferativa de células musculares lisas vasculares (cMLV) en cultivo de aorta y vasos mesentéricos a suero fetal bovino al 10 por ciento e insulina (100 µU/ml), por incorporación de [üH]-timidina, y se estudiaron los receptores para IGF-1. El grupo FFR desarrolló intolerancia a la glucosa e HTA con hipertrofia cardíaca. Las cMLV en cultivo mostraron mayor proliferación frente a un estímulo inespecífico como SFB 10 por ciento, pero no frente a la insulina, lo cual coincidió con disminución en el número de receptores para IGF-1. Estas observaciones podrían contribuir a la explicación de los mecanismos involucrados en las alteraciones cardiovasculares asociadas con insulinorresistencia

Renal functional reserve and microalbuminuria excretion in vesicoureteral reflux after surgery correction

Se evaluó el efecto agudo de una sobrecarga proteica oral sobre la velocidad de filtración glomerular - reserva funcional renal (RFR) 0 y la excreción urinária de albumina, en 9 pacientes pediátricos con reflujo vesicoureteral bilateral grado IV, después de la corrección quirúrgica (Grupo I). Los resultados fueron comparados con los de 9 niños con infecciones urinarias repetidas pero sin reflujo (Grupo II) y de 6 niños controles sanos de edad similar (Grupo III). La urografia intravenosa, practicada durante el año del estudio, reveló la presencia de escaras renales en 10 riñones de los niños del Grupo I y en 2 riñones de los del Grupo II. Al momento de este estudio, todos los niños valores normales de creatinina plasmática. El clearance de inulina basal fue significativamente menor en los pacientes con reflujo vesicoureteral. Se encontró buena correlación entre el área parenquimal de ambos riñones y el clearance de inulina basal. Luego de la sobrecarga proteica se registró un aumento en el clearance de creatinina y de inulina en los niños controles y con infecciones urinarias. No se observó cambio después de la sobrecarga en los pacientes con reflujo. La excreción de microalbuminuria fue significativamente mayor en los niños del Grupo I durante el período control. No se observaron cambios después de la sobrecarga en ninguno de los grupos estudiados